Medios clásicos de cultivos
Genproducts Company
A través de Lonza ofrece una extensa línea de medios de cultivos y reactivos respaldados por años de experiencia e innovación. Gracias a todos los años de estrecha relación estamos en la capacidad de ofrecer a nuestro cliente soporte técnico permanente en forma de protocolos, información detallada de los productos además de diferentes consejos para la resolución de problemas para nuestro amplio rango de medios y reactivos.
Medios Libres de suero animal
El suero es un suplemento que contiene factores de crecimiento, requeridos para el crecimiento celular. Desafortunadamente agregar suero, significa agregar un producto muy variable y no estandarizado a un sistema bien ordenado. El origen no estandarizado del suero requiere de testeo extenso de diferentes lotes para encontrar el lote compatible con el tipo de células que el usuario requiera.
El substituto cuando se cultivan células en un medio basal enriquecido estándar que contenga aminoácidos, simplemente remplaza el suero con el sustituto de suero HL-1 TM que es un aditivo para medios sin suero. El HL-1 TM sustituye o disminuye significativamente la concentración del suero en una variedad de medios basales.
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Control de micoplasma
La contaminación por micoplasma de cultivos celulares, pueden impactar seriamente la confiabilidad, la reproductividad y consistencia de sus resultados experimentales.
La contaminación por micoplasma es muy difícil de detectar por lo que su presencia puede pasar desapercibida incluso durante meses. Esto muestra la importancia de un examen de rutina el cual nos ayude a asegurarnos que estamos trabajando con cultivos no contaminados.
El tipo y la severidad de estos efectos dependerán del tipo de celula que se este usando. Algunos efectos generales observados en células eucariotas pueden incluir:
- Alteraciones en los niveles de proteína, síntesis ARN, ADN debido a la deprivación de nutrientes.
- Cambios en la morfología celular.
- Aumento o disminución en la expresión de citoquinas.
Micoplasma en cultivo celular
Una de las razones por las que la micoplasma es difícil de detectar en los cultivos celular es que esta contaminación no suele desencadenar los cambios de turbidez que comúnmente se presentan en otro tipo de contaminación bacteriana. Adicionalmente esta bacteria es tan pequeña que su visualización de dificulta incluso con un microscopio óptico sin la ayuda de un etiquetado especifico. Sin embargo, los cultivos celulares pueden mostrar ligeros cambios que son característicos de la micoplasma, algunos ejemplos de estos cambios son:
- Reducción en la tasa de proliferación celular debido a la competencia por nutrientes del cultivo celular entre la micoplasma y las células.
- Agregación Celular.
- Cambios morfológicos.
- Poca eficacia en la transfección, esto puede ser más fácil de detectar cuando se esta trabajando con células que en el pasado solían mostrar mayor eficacia en la transfección.
Detección del micoplasma
La única manera para detectar la micoplasma es haciendo exámenes específicos que permitan su detección. Existe gran variedad de técnicas que permiten la detección de la micoplasma incluyendo tinción histoquímica, Elisa, Tinción del ADN con fluorocromo, cultivo microbiológico, métodos bioquímicos y PCR.
Otro de los métodos para la detección de la micoplasma es la búsqueda de enziimas en los cultivos celulares que son producidas por la micoplasma y que no se encuentran presentes en las células eucariotas. A través de Lonza Genproducts Company ofrece el kit MycoAlertTM PLUS Mycoplasma Detection Kit, el cual contiene la enzima luciferasa como reportero.
